hUC –MSCs ，人脐带间充质干细胞 ：

中文名称：人脐带间充质干细胞 

代号：hUC –MSCs  

出售信息：P1代和P3代

来源：取自满月自然分娩的胎儿脐带，检测结果表明，本产品无细菌、真菌、支原体和病毒污染，表达多种间充质干细胞特异标记，具有良好的增殖和分化潜能，可以分化为成骨细胞、脂肪细胞、软骨细胞等。

生长特性：贴壁生长（形态纺锤状，成纤维细胞样）

培养条件： DMEM/F12 90%+FBS 10%+b-FGF 10ng/mL （建议使用本公司间充质干细胞无血清培养基）

温度：37℃  气相：95%空气，5%二氧化碳

培养瓶/皿：使用无血清培养基时应使用针对间充质干细胞特别TC处理的培养瓶/皿，或使用纤连蛋白或其他促贴壁试剂包被过的培养瓶/皿。

一、细胞特性：

经测试，本产品具有良好的增殖和分化潜能，可分化为成骨细胞、脂肪细胞、软骨细胞等。流式检测结果显示，CD29、CD44、CD73、CD105、CD166阳性，CD11a、CD34、CD45阴性。

二、运输保存：采用干冰保存运输

收到细胞时，若干冰已经*融化，请立即将细胞复苏培养；若尚留有干冰，请立即将细胞放入液氮中保存待用，请按条件贮存细胞，切不可将细胞置于高温环境。

三、产品承诺：

人脐带间质干细胞的体外培养周期有限。建议使用本公司配套的培养基和正确的培养方法来解冻、传代，以此保证细胞具备良好的增殖和分化能力。

四、用途：

本产品只提供给进一步的科研使用，不可应用于治疗、临床等其他方面。

1、用75%酒精喷洒整个培养瓶消毒，将其平躺置于培养箱中进行1-3小时的缓冲，然后置于无菌操作台，打开瓶口，将其中的培养液去掉，再往其中加入5-6 mL新鲜培养基（以T25培养瓶为例）并置于细胞培养箱中培养，根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液以及传代，一般2到3天换一次液。

2、待细胞长满瓶底面积80%-90%，需要对其进行传代，*次传代比例为1:3，之后推荐传代比例为1:5到1:10。

3、传代步骤：将0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化液与DPBS置于37°预热，倒掉培养瓶中的培养基，往培养瓶中加入3-5 ml DPBS，轻晃洗涤后弃去。使用DPBS将胰酶稀释4倍，往瓶中加2 ml稀释后的胰酶，置于室温孵育消化（*次消化需时常取出置于显微镜下观察，以显微镜下细胞触角回收变圆、轻拍瓶壁见细胞脱落为*消化时间，记录*消化时间，以便于下次消化），消化好后加入2ml含血清的*培养基或其他胰酶中和液终止消化。用移液枪轻轻吹打瓶壁上的细胞，使之*脱落，然后收集细胞悬液并吹打成单个细胞悬液，1200rpm离心5min，弃上清，加入*培养基重悬细胞，进行传代。

五、冻存条件：液氮存储

80%*培养基+10%FBS+10%DMSO，备注：建议使用本公司的冷冻液（H-W-100），用4度保存的冷冻液直接重悬细胞，不能预热后使用。

六、常见问题以及解决方案：

1、培养瓶有破裂，培养液有漏液：细胞极大可能会污染，所以我们会及时安排帮老师解决。

2、收到细胞后尽快更换为含 10%血清的新鲜培养基，如因特殊情况需要继续使用原瓶培养基，请在原瓶培养基中额外添加 10%的血清（原瓶培养基的继续使用时间长不宜超过 72 小时）。

3、细胞漂浮：培养瓶不开封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。1-2小时后观察，如细胞大部分又贴回瓶底，表明细胞活力正常，剩余漂浮的细胞可以去掉，留8-10ml培养液培养观察，细胞生长至汇合度80%，进行消化传代；如细胞还是不贴壁，将细胞离心收集转到新培养瓶，原培养瓶加部分培养液继续培养，中间注意观察，我们的技术人员会一直跟踪指导，直到问题解决。

hUC –MSCs ，人脐带间充质干细胞以上说明书仅供参考，请以随货说明书为主。