HCoEpiC，人正常结肠上皮细胞，上海细胞库    

上海蒂科生物专注细胞培养，主营业务：胎牛血清（HAKATA、HyClone、SERANA、NTC、Corning、BOVOGEN、PAA、PAN、SIGMA等品牌），无外泌体血清(SBI)，ELISA试剂盒，细胞（400多种类通过STR鉴定）包含大鼠、小鼠、人、猫、株、兔子等种属，HAKATA和HyClone培养基（干粉、液体）、双抗、胰酶，CST，abcam，sigma等品牌抗体，详询。

★CQ★“细胞空泡化”在细胞培养中也是一个常见问题，它的出现原因有多种，实验人员碰到往往会很头疼。

在文章中小编给大家列举出了可能出现这种情况的原因，方便大家进行分析选择解决的方法。

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★CQ★可以引起细胞空泡化出现的原因有哪些那？

1）细胞老化

原代细胞培养的过程中经常出现这样的情况，是有些细胞处于终末分化状态，不会再分裂，时间长了就会空泡化而死亡。

传代细胞出现这种状况比较少见，出现的原因一般都是因为细胞传代次数过多，老化严重。

2）PH值

培养液的PH值与细胞正常所需PH值差别太大。

3）胰酶消化

 胰酶消化时间过长，会导致细胞状态受损，有时也会出现这种情况。除此之外，还有一个大家容易忽略的问题,在香港的一家科研机构表明如果消化细胞吹打时力度过大，产生太多气泡，长期存在也会出现这种现象。

4）自噬

细胞缺乏营养导致饥饿诱导形成自噬也会形成空泡化，但是这种空泡在光学显微镜下是看不到的，只有在电镜下才能观察到。

5）细胞代谢

在细胞培养过程中，由于血清浓度不够、药物作用、外界刺激等情况下导致细胞代谢出现问题，内质网应激状况下会出现细胞空泡化的情况。

6）污染

衣原体感染：一旦一些细胞出现空泡化，继续培养，空泡范围会扩大，即使传代后也如此，出现这种情况，细胞基本无法挽救。后来检测发现，此种细胞存在衣原体的感染。

★CQ★支原体污染：支原体污染在不严重的时候细胞是没有什么明显症状的，而且也无法通过光学显微镜观察到，只有在严重的时候会导致细胞状态变差，出现细胞空泡化的现象，细胞膜上也会出现小黑点附着。

★CQ★病毒污染：在文献上也有说病毒污染也会导致细胞出现空泡化的情况。

遇到细胞空泡化我们应该如何解决？

1）如果是因为细胞老化的原因，可以通过复苏代数靠前的细胞进行培养。

2）如果是培养液PH的问题，可以通过更换培养液调整到合适的PH值，再进行培养。

3）在传代时，要选用合适浓度的胰酶和选取适当的消化时间进行消化，在操作时避免吹打太过用力出现太多气泡。

4）要保证细胞培养所需的营养充足，可以通过增加血清浓度和在培养基中加入谷氨酰氨解决。

5）尽量使用质量好和渠道正规的胎牛血清，因为这样的血清营养丰富且外源刺激因子少，可以有效的避免出现这类问题。

6）在细胞培养时要严格进行无菌操作，操作时要规范，减少污染的可能性。可以通过试剂盒检测细胞是否污染，对于已经污染的细胞灭菌后直接处理，避免污染其他细胞。

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