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上海细胞库,人滤泡性甲状腺癌细胞,FTC-133,细胞培养试剂*:
上海蒂科生物主营业务:胎牛血清(HAKATA、HyClone、SERANA、NTC、Corning、BOVOGEN、PAA、PAN、SIGMA),无外泌体血清SBI,ELISA试剂盒,细胞(400多种类通过STR鉴定),培养基(干粉、液体),双抗,胰酶,CST,abcam,sigma等抗体。详询(同号)。
细胞培养是实验室里zui常见和zui基本的实验了,但却不是zui简单的。别小看细胞培养,这里可蕴含着大学问。有时候细胞状态不好,转染、药筛这些实验根本就没办法做。影响细胞培养的因素很多,让我们先从培养基和血清说起。
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经典的培养基有很多种,HAKATA、HyClone、Sigma等。其中DMEM、RPMI-1640、MEM、DMEM/F12都是应用zui广泛的培养基。其他如M199、IMDM、L15培养基等也用于某些细胞的培养。
◆ MEM是由Eagle’s基础培养基(BME)发展而来的,其中增加了组分的范围及浓度。
◆ Dulbecco改良的BEM(DMEM)培养基是为小鼠成纤维细胞设计的,现在常用于贴壁细胞的培养。
DMEM的氨基酸浓度是MEM的两倍,维生素浓度是MEM的4倍,采用双倍的HCO3-和CO2浓度起到更好的缓冲作用。zui初的配方中葡萄糖含量为1000 mg/L,后来为了某些细胞的生长需要,将葡萄糖含量又调整为4500 mg/L,这就是大家常说的低糖和高糖了。
◆ aMEM含有附加的氨基酸、维生素以及核苷和脂肪酸,它可广泛应用于各种细胞类型,包括对营养成分要求苛刻的细胞。
◆ Ham’s F12是为在低血清浓度下克隆CHO细胞而设计的,现在也广泛应用于克隆形成率的分析及原代培养。F12还可以与DMEM等体积混合使用,得到一种高浓度与成分多样化相结合的产物,这种培养基已应用于许多原代培养及更难养的细胞系的培养。
◆ RPMI-1640培养基是专为淋巴细胞培养而设计的,现在已广泛应用于悬浮细胞的培养。
上海,细胞培养试剂*:
以前经常听到有人问,这种细胞该用哪一种培养基呢?其实这个问题的答案可以很简单,也可以好复杂。此话怎讲?如果这种细胞是购自ATCC 或其他的细胞库,那很简单,问供应商就行了。或者找到相关的文献,作为参考。 Invitrogen上有一个Cell Line Database的工具,也很好用。选择你感兴趣的细胞类型,它就会弹出推荐的培养基、血清和转染试剂等,有时还有优化好的转染步骤,很方便。Sigma上也有一个Media Expert,包括了培养基所有成分的功能描述、使用推介和参考文献等,它还是一个解决问题能手,对于细胞培养中的常见问题,如细胞贴壁不好、培养基变色等,它都会列出可能的原因,并提供补救办法。这个Expert果然不简单! 但如果你是着手建立一种全新细胞的培养体系,根本找不到任何参考,那你就得花点时间自己试验了。万事开头难嘛。因为没有一个标准答案。在MEM中培养的细胞,很可能在DMEM或M199中同样很容易生长。总之,shou选MEM做贴壁细胞培养、RPMI 1640做悬浮细胞培养会是一个好的开始。你也可以购买几种培养基来,然后花大约两周的时间做一个简单的细胞生长实验,来选择其中zui适合的。有时候你会惊讶地发现你的zui佳培养条件与文献报道的不同,就算是同一种培养条件,细胞的生长状态也时好时坏,这是很正常的。因为试剂、水、不同批号的血清之间都存在着差异。要提高培养基的稳定性,可以从培养基和血清两方面入手。
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以前大部分实验室都是用干粉培养基,但配制过程就较为繁琐,要溶解、调pH值,过滤,过程中可能会产生一些浓度误差,而且有些实验室的水质并不理想,所以培养的效果会有差异。如果使用液体培养基,这种人为的误差会减少,因为毕竟是大批量工业化生产的,批间差会很小。大家是不是感觉液体培养基会贵很多,以前是这样,但现在非也。HyClone和Invitrogen都在国内建立了液体培养基的生产基地,生产和运输成本大幅降低,所以现在的价格也只是50-60元/500ml,比干粉培养基贵不了多少,而且还帮你省了过滤器和时间。
血清含有生长因子可促进细胞的繁殖,含有附着因子可促进细胞的贴壁,同时还具有抗胰酶活性。血清同时也是矿物质、脂类及激素的来源。zui常用的血清有小牛血清、新生牛血清、胎牛血清和马血清等。牛血清是按照采血时间的早晚来分类的。采血时间越早,营养物质越丰富,所含抗体也越少,因而胎牛血清适合要求高的细胞系和克隆化培养。由于疯牛病的原因,到目前为止,我国政府仍然禁止从北美洲、欧洲和日本等地区进口牛血清,因此市面上的牛血清大多来自澳洲、南美洲,或是国产的。 而血清批次间的差别就是不可避免的,这种差异来源于不同的制备方法和除菌方法、动物的年龄差别及血清的储存条件等,而且与取血动物的来源关系密切。不同的牧场、不同的气候天气及其他环境因素都可能影响血清的质量。因此选好了一种血清就要尽可能长期使用它。在需要更换时,也要尽量保持与原有的一批血清相似。
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现在很多公司都提供血清预留,你一旦选定了某个批次的血清,zui好备足一年的量,这样可以避免很多麻烦。血清固然是细胞培养中*的成分,但正如上文所说,血清的批间差异大,更换血清时需要做大量的测试以取保替换的血清与原来的相似。而血清的供应也是必须要考虑的因素。由于气候或疯牛病的影响,说不定哪天血清就突然没得卖了,那对实验的影响可非同小可。另外,血清的价格也很昂贵,虽说现在也有便宜的国产血清,但是高品质的澳洲血清价格仍旧高起。因此,也有一些实验室开始换用无血清培养基。
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常备现货液体培养基:
Hylone 双抗 | SV30010 | 100ml | HAKATA 双抗 | 15140-122 | 100ml | ||||
Hylone 胰酶 | SH30042.01 | 100ml | HAKATA 胰酶 | 25200-056 | 100ml | ||||
DMEM低糖 | SH30021.01 | 500ml | HAKATA 胰酶 | 25200-072 | 500ml | ||||
DMEM高糖(不含丙酮酸钠) | SH30022.01 | 500ml | HAKATA B-27™ 添加剂 | 17504-044 | 10ml | ||||
DMEM/F12 1:1 | SH30023.01 | 500ml | HAKATA B-27™ 添加剂 | 12587-010 | 10ml | ||||
MEM/EBSS | SH30024.01 | 500ml | RPMI1640培养基 | 31800-022 | 10*1L | ||||
HAM'S/F12 | SH30026.01 | 500ml | DMEM培养基(高糖)含丙酮酸钠 | 12800017 | 10*1L | ||||
IMDM | SH30228.01 | 500ml | DMEM培养基(高糖) 不含丙酮酸钠 | 12100046 | 10*1L | ||||
DMEM高糖(含丙酮酸钠) | SH30243.01 | 500ml | DMEM高糖培养基 | C11995500BT | 500ml | ||||
M199/EBSS | SH30253.01 | 500ml | DMEM低糖培养基 | C11885500BT | 500ml | ||||
PBS缓冲液 | SH30256.01 | 500ml | PBS | C10010500BT | 500ml | ||||
α-MEM | SH30265.01 | 500ml | 1640培养基 | C11875500BT | 500ml | ||||
改良型RPMI-1640 | SH30809.01 | 500ml | DMEM/F12 | C11330500BT | 500ml | ||||
Mv-4-11 | 人急性单核细胞白血病细胞 | MMQ | 大鼠垂体瘤细胞 | ||||||
RPMI 8226 | 人多发性骨髓瘤细胞 | GH3 | 大鼠垂体瘤细胞 | ||||||
NALM-6 | 人急性B淋巴白血病细胞 | 大鼠LSECs | 大鼠肝窦内皮细胞 | ||||||
Nthy-ori 3-1 | 人甲状腺正常细胞 | MOLP-2 | 人多发性骨髓瘤细胞 | ||||||
FHC | 人正常结直肠粘膜细胞 | BTT739 | 小鼠膀胱移行细胞癌 | ||||||
FLS | 大鼠成纤维样滑膜细胞 | A875 | 人黑色素瘤细胞 | ||||||
HFL | 人成纤维样滑膜细胞 | SNU-761 | 人肝癌传代细胞 | ||||||
HLEB3 | 人晶状体上皮细胞系 | HPaSteC(HPSC) | 人胰腺星状细胞 | ||||||
HN13 | 人口腔鳞状细胞癌细胞 | BMDC | 小鼠树突状细胞 | ||||||
RLE-6TN | 大鼠肺上皮Ⅱ型细胞 | McCoy | 小鼠成纤维细胞 | ||||||
PA-TU-8988S | 人胰腺癌细胞 | SU86.86 | 人胰腺导管癌细胞 | ||||||
HEEC | 人正常食管上皮细胞 | KYSE140 | 人食管鳞癌细胞 | ||||||
MES-SA | 人子宫肉瘤细胞 | WSU-DLCL2 | 人弥漫大B淋巴瘤细胞 | ||||||
MCFs | 小鼠心肌成纤维细胞 | NCI-H596 | 人肺鳞癌细胞 | ||||||
EHEB | 人慢性B细胞白血病细胞 | CCD-19Lu | 人肺成纤维细胞 | ||||||
SNK6 | 人NK/T细胞淋巴瘤细胞 | HIMEC | 人肠微血管内皮细胞 | ||||||
PIG1 | 正常人皮肤黑色素细胞 | HDSMC | 人表皮血管平滑肌细胞 | ||||||
hTERT-RPE1 | 人视网膜色素上皮细胞 | EM-3 | 人髓系白血病细胞 | ||||||
ARPE-19/APRE-19 | 人视网膜色素上皮细胞 | KYSE50 | 低分化人食管鳞癌细胞 | ||||||
HO8910PM | 人卵巢癌细胞 | DSL-6A/C1 | 大鼠胰腺癌细胞 | ||||||
IPI-2I | 猪回肠上皮细胞 | PC14 | 人肺癌细胞 | ||||||
RT4-D6P2T | 大鼠神经雪旺氏细胞 | Capan-1 | 人胰腺管癌细胞 | ||||||
HUVEC | 人脐静脉血管内皮细胞 | TEV-1 | 人滋养层细胞 | ||||||
HTR8-SVneo | 人绒毛膜滋养层细胞 | MZ-CRC-1 | 人髓样甲状腺癌细胞 | ||||||
KG-1a | 人急性骨髓白血病细胞 | HS27 | 人皮肤成纤维细胞 | ||||||
OCI-AML3 | 人急性髓细胞性白血病细胞 | H2.35 | 小鼠肝细胞 | ||||||
bEnd.3 | 小鼠脑微血管内皮细胞 | KMBC | 人胆管癌细胞 | ||||||
C4-2 | 人前列腺癌细胞 | KHYG-1 | 人NK细胞淋巴瘤细胞 | ||||||
C4-2B | 人前列腺癌细胞 | Nutu19 | 大鼠卵巢癌细胞 | ||||||
DOK | 人口腔黏膜癌前病变细胞 | KU-19-19 | 人膀胱癌细胞 | ||||||
SCC-15 | 人舌磷癌细胞 | HUH-1 | 人肝癌细胞 | ||||||
DT40 | 鸡淋巴瘤细胞 | NCI-H1373 | 人肺腺癌细胞 | ||||||
RBE4 | 大鼠脑血管内皮细胞 | Colo357 | 人胰腺癌细胞 | ||||||
SCC-090 | 人口腔鳞癌细胞 | LSC-1 | 大鼠肝星形细胞 | ||||||
SCC-9 | 人舌鳞癌细胞 | CCC-HPF-1 | 人胚肺成纤维细胞 | ||||||
SCC-4 | 人舌鳞癌细胞 | HAPI | 大鼠小胶质细胞 | ||||||
SCC-25 | 人舌鳞癌细胞 | NCI-H322[H322] | 人非小细胞肺癌细胞 | ||||||
THLE-2 | SV40转化人肝上皮细胞 | HT115 | 人结肠癌细胞 | ||||||
THLE-3 | SV40转化人肝上皮细胞 | CCD-841 CoTr | 人结肠癌细胞 | ||||||
CAL-51 | 人乳腺癌细胞 | CNLMG-B5537SKIN | 人成纤维细胞 | ||||||
CAL-148 | 人乳腺癌细胞 | TMK-1 | 人胃癌细胞 | ||||||
ZYM-DIEC02 | 猪小肠上皮细胞 | GTL16 | 人胃癌细胞 | ||||||
G422 | 小鼠脑神经胶质母细胞 | SW954 | 人外阴鳞癌细胞 | ||||||
BMSC/hBMSCs | 人骨髓间充质干细胞 | HHL-5 | 人胚胎肝细胞 | ||||||
VCaP | 人前列腺癌细胞 | NHLF | 人正常肺成纤维细胞 | ||||||
VX2 | 兔间变表皮鳞癌瘤株 | MOLP-8 | 人多发性骨髓瘤细胞 | ||||||
CF-1 MEF | 小鼠胚胎成纤维细胞 | MCF-12F | 人乳腺上皮细胞 | ||||||
AR42J | 大鼠胰腺外分泌细胞 | NCI-H226 | 人肺鳞癌细胞 | ||||||
PMVEC | 大鼠肺微血管内皮细胞 | MCAEC | 小鼠冠状动脉内皮细胞 | ||||||
GES-1 | 人胃粘膜细胞 | IAR20 | 大鼠肝细胞 | ||||||
Toledo | 人弥漫大B细胞淋巴瘤细胞 | NCI-H2087 | 人非小细胞肺癌细胞 | ||||||
9L | 大鼠胶质瘤细胞 | MDA-PCA-2B | 人前列腺癌细胞 | ||||||
MLE-12 | 小鼠肺上皮细胞 | OCM-1A | 人脉络膜黑色素瘤细胞 | ||||||
KBM5 | 人慢性髓白血病细胞 | SHP-77 | 人小细胞肺癌细胞 | ||||||
VSC4.1 | 脊髓前角运动神经元瘤细胞系 | MBMEC | 小鼠脑微血管内皮细胞 | ||||||
HIC | 人小肠癌细胞系 | DMS114 | 人小细胞肺癌细胞 | ||||||
LN-18 | 人神经胶质瘤细胞 | RCC4 | 人肾癌细胞 | ||||||
Kupffer | 肝枯否细胞 | HOMEC | 人卵巢微血管内皮细胞 | ||||||
SNU475 | 人肝癌细胞 | PZ-HPV-7 | 人前列腺上皮细胞 | ||||||
T98G | 人脑胶质细胞瘤细胞 | HECCL-1 | 人子宫内膜癌细胞 | ||||||
HMEC-1 | 人微血管内皮细胞株 | Rca-B | 大鼠鳞癌细胞 | ||||||
NCTC1469 | 小鼠正常肝细胞 | NCI-H1703 | 人肺鳞癌细胞 | ||||||
HIEC | 正常人肠上皮细胞 | LAPC4 | 人前列腺癌细胞 | ||||||
HPDE6-C7(H6C7) | 人正常胰腺导管上皮细胞 | hOMF | 正常人口腔粘膜成纤维细胞 | ||||||
RGC-5 | 小鼠视网膜神经节细胞 | CSQT-2 | 人肝癌细胞 | ||||||
hRMECs | 人视网膜微血管内皮细胞 | RMC | 大鼠肾系膜细胞 | ||||||
MN9D | 小鼠中脑多巴胺能神经元细胞 | HEC-251 | 人子宫内膜癌细胞 | ||||||
HCS-2/8 | 人软骨肉瘤细胞 | JVM-3 | 人慢性髓白血病细胞 | ||||||
RTE | 大鼠气管上皮细胞 | MM96L | 人黑色素瘤细胞 | ||||||
NCI-H1993 | 人肺腺癌细胞 | HHUA | 人子宫内膜癌细胞 | ||||||
MONOMAC6 | 急性单核细胞白血病细胞 | SAS | 人舌鳞癌细胞 | ||||||
SU-DHL-10 | 人弥漫大B细胞淋巴瘤细胞 | HSAS1 | 人皮肤成纤维细胞 |