细胞细胞培养面面观

具体步骤：

1.将水浴锅预热至40℃

2.用75％酒精擦拭紫外线照射30min的超净工作台台面。

3.在超净工作台中按次序摆放好消过毒的离心管、吸管、培养瓶等等。

4.根据细胞冻存记录按标签找到所需细胞的编号。

5.从液氮罐中取出细胞盒，取出所需的细胞，同时核对管外的编号。

6.迅速将冻存管投入到已经预热的水浴锅中迅速解冻，并要不断的摇动，使管中的液体迅速融化。

7.约1-2min后冻存管内液体*溶解，取出用酒精棉球擦拭冻存管的外壁，

8.平衡后，放入离心机中3000r/min 离心3min

9.吸弃上清液。

10.向冻存管内加入1ml培养液，吹打制成细胞悬液。

zui后将细胞悬液分装入培养瓶内，将培养瓶放入37℃和5％CO2的培养箱内12-24小时后换液继续培养培养，换液的时间由细胞情况而定。
 

注意事项：

1>复苏时选用的培养基要符合冻存管上标明的培养基。2>操作人员应戴防护面罩及手套，防止冷冻管可能爆裂之伤害。3>自液氮或干冰容器中取出冷冻管，检查盖子是否旋紧，由于热胀冷缩过程，此时盖子易松掉。