ZR-75-30细胞,细胞株培养技术
细胞细胞培养面面观
具体步骤:
1.将水浴锅预热至40℃
2.用75%酒精擦拭紫外线照射30min的超净工作台台面。
3.在超净工作台中按次序摆放好消过毒的离心管、吸管、培养瓶等等。
4.根据细胞冻存记录按标签找到所需细胞的编号。
5.从液氮罐中取出细胞盒,取出所需的细胞,同时核对管外的编号。
6.迅速将冻存管投入到已经预热的水浴锅中迅速解冻,并要不断的摇动,使管中的液体迅速融化。
7.约1-2min后冻存管内液体*溶解,取出用酒精棉球擦拭冻存管的外壁,
8.平衡后,放入离心机中3000r/min 离心3min
9.吸弃上清液。
10.向冻存管内加入1ml培养液,吹打制成细胞悬液。
zui后将细胞悬液分装入培养瓶内,将培养瓶放入37℃和5%CO2的培养箱内12-24小时后换液继续培养培养,换液的时间由细胞情况而定。
注意事项:
1>复苏时选用的培养基要符合冻存管上标明的培养基。2>操作人员应戴防护面罩及手套,防止冷冻管可能爆裂之伤害。3>自液氮或干冰容器中取出冷冻管,检查盖子是否旋紧,由于热胀冷缩过程,此时盖子易松掉。