DMSO是目前常用的细胞冻存保护剂，一般使用时终浓度控制在5~10%，最佳浓度取决于细胞类型。

一般来说，存活率比较高的细胞系，培养基、血清、DMSO按照7：2：1的比例新鲜配制使用。

细胞计数后，用配制好的细胞冻存液重悬细胞，至5×10^6 ~ 1×10^7 cells/mL，然后1~1.5mL/管分装冻存。

对于存活率较低的细胞系，或者需要长时间保存的细胞系，可以增加冻存液中的血清浓度，血清和DMSO按9：1的比例配制。

另外，还有商品化的无血清冻存液可以选择，不需要预先配制。一般会含有多种保护剂成分，适用于特别珍贵的细胞的保存，例如干细胞、分离后的免疫细胞等等。