当前位置:首页  >  技术文章  >  冷冻细胞活化步骤

冷冻细胞活化步骤
时间:2022-01-19      阅读:246
1.冷冻细胞的活化原则为快速解冻,避免冰晶重新结晶对细胞造成伤害,导致细胞死亡。


2.细胞活化后,约需数日,或继代一至二代,其细胞生长或特性表现才会恢复正常(例如产
生单株抗体或是其它蛋白质)。2y2Q O6\#o&h4@+z,~
3.材料37℃ 恒温水,新鲜培养基,无菌吸管/离心管/培养瓶,液氮或干冰容
4.步骤:
4.1操作人员应戴防护面罩及手套,防止冷冻管可能爆裂之伤害。
4.2自液氮或干冰容器中取出冷冻管,检查盖子是否旋紧,由于热胀冷缩过程,此时盖子易
松掉。
4.3将新鲜培养基置于37°C水槽中回温,回温后喷以70%酒精并擦拭之,移入无菌操作台内。
4.4取出冷冻管,立即放入37°C水槽中快速解冻,轻摇冷冻管使其在1分钟内全部融化以70%ethanol擦拭保存管外部,移入无菌操作台内。
4.5取出0.9ml解冻之细胞悬浮液,缓缓加入有培养基之培养容器内(稀释比例1:10~1:15)混合均匀,放入CO2培养箱培养。另取0.1ml解冻细胞悬浮液作存活测试。
4.6解冻后是否立即去除冷冻保护剂(例如DMSO或glycerol),依细胞种类而异,一般而言大都不需要立即去除冷冻保护剂。惟若要立即去除,则将解冻之细胞悬浮液加入含有5-10ml培养基之离心管内,离心1,000rpm,5分钟,移去上清液,加入新鲜培养基,混合均匀,放入CO2培养箱培养。
4.7若不需立即去除冷冻保存剂,则在解冻培养后隔日更换培养基。


电话 询价

产品目录