当前位置:首页  >  技术文章  >  细胞培养中培养基的作用

细胞培养中培养基的作用
更新时间:2022-01-13      阅读:1212
1.液体培养基贮存于4℃ 冰箱,避免光照,实验进行前放在37℃ 水槽中温热。0S'、


2.液体培养基(加血清)存放期为六个月,期间glutamine可能会分解,若细胞生长不佳
可以再添加适量glutamine。
3.粉末培养基配制(以1升为例):
3.1.细胞培养基通常须添加10%血清,因此粉末培养基之配制体积为900ml,pH为7.2-7.4。NaHCO3为另外添加,若将NaHCO3粉末直接加入液体培养基中会造成pH之误差,或局部过碱。因此粉末培养基及NaHCO3粉末应分别溶解后才混合,然后用CO2气体调整pH,而非用强酸(HCl)或强碱(NaOH),因为氯离子对细胞生长可能有影响,且贮存时培养基的pH易发生改变。生物3.2.材料:纯水(milli-Q水或二次至三次蒸馏水,水品质非常重要),粉末培养基,NaHCO3
电磁搅拌器,无菌血清瓶,0.1或0.2mm无菌过滤膜,pH计,真空泵,CO2气体。
3.3.步骤:
3.3.1.取粉末培养基溶于700mlmilli-Q水中,搅拌使其溶解。
3.3.2.称取适量之NaHCO3粉末溶于200mlmilli-Q水中,搅拌使其溶解,然后通入CO2气体至饱和,约3-5分钟。
3.3.3.将溶解且含饱和CO2之NaHCO3溶液加入溶解之液体培养基中混合。混后溶液之pH应为7.2-7.4,除非pH值偏差太大,否则不需用酸碱再调整之。若为太碱,可再通入CO2气体调整pH。培养基以真空帮浦通过过滤膜时,pH会升高0.1-0.2。
3.3.4.以0.1或0.2mm无菌过滤膜过滤灭菌,同时分装至无菌容器中,标示培养基种类、日期、瓶号等,贮存于4℃。(血清亦可加入培养基中一起过滤)
3.3.5.配制之培养基配制须作生长试验与污染测试。



电话 询价

产品目录