血清10099-141血清的溶解与保存

血清，指血液凝固后，在血浆中除去纤维蛋白分离出的淡黄色透明液体或指纤维蛋白已被 除去的 血浆。其主要作用是提供基本营养物质、提供激素和各种生长因子、提供结合蛋白 、提供促接触和伸展因子使细胞贴壁免受机械损伤、对培养中的细胞起到某些保护作用。

1、如果不用，先放置-80℃保存。

2、如果要用，可于4℃冰箱放置过夜，再在室温溶解。

3、溶解好的血清应立即分装，-80℃保存。

4、保存于-80℃的血清解冻时应先与4℃冰箱放置过夜再在室温溶解。切勿直接放在室温溶解。

细胞传代方法

根据细胞生长的恃点，传代方法有3种：

1．悬浮生长细胞传代

离心法传代：离心（1000转/分）去上清，沉淀物加新培养液后再混匀传代。

直接传代法：悬浮细胞沉淀在瓶壁时，将上清培养液去除l／2一2／3，然后用吸管直接吹打形成细胞悬液再传代。

2．半悬浮生长细胞传代（杂交瘤）

此类细胞部分呈现贴壁生长现象，但贴壁不牢，可用直接吹

打法使细胞从瓶壁脱落下来，进行传代。

3．贴壁生长细胞传代

采用酶消化法传代。常用的消化液有0.25％的胰蛋白酶液。

细胞冷冻保存

细胞应生长良好，处于对数生长期，密度为80%左右。

2.注意冷冻保护剂之品质。DMSO质量要好，应无菌且无色。

3.冷冻保存之细胞浓度：一般成纤维细胞1~3x106cells/ml，悬浮细胞5~10x106cells/ml，上皮细胞2~5x106。

4.冻存液的配方是：60%无血清培养液30%血清10%DMSO