细胞生物污染是指如细菌、类芽孢杆菌、霉菌、酵母、病毒、支原体、黑胶虫和其他细胞都可能侵入细胞培养环境引起污染。
生物性污染对细胞代谢的影响,可因污染源和细胞的种类不同而表现各异。
细菌
培养物通常呈云雾状(即浑浊状),有时表面会覆盖一层薄膜
pH突然降低
高倍镜下可分辨出细菌的形状
类芽孢杆菌
显微镜下看到细胞间会有一些杆状游动的小虫子
类芽孢杆菌增殖很快跟细胞竞争营养
前期培养液不浑浊
对各种抗生素无效,难以清除,换掖冲洗后也无效
可能通过培养箱空气进行污染
霉菌
培养物浑浊
污染初期pH值稳定,严重后pH值迅速升高
显微镜下通常呈细束状纤维,或较为密集的孢子团块
酵母菌
培养基变浑浊,尤其是污染后期
一般pH值变化很小,严重时pH值升高
显微镜下呈卵圆形或球形颗粒,有些会芽生较小颗粒
支原体
体积较小(一般<1um),导致难以发现
细胞增殖速度降低,饱和密度下降,悬浮培养物聚集
定期检测培养物(支原体检测试剂盒(MycoTest Kit)
黑胶虫
与细胞共生,细胞长的好或密度大的话,做布朗运动的小黑点就少,反之则多;
对抗生素无效;
可以通过培养箱空气进行污染;
换掖冲洗后也无效。
病毒
体积极小,检测及去除十分困难
常常因为观察到细胞生长和形态发生改变而发现
会对实验室工作人员造成严重的健康威胁
使用质量好的血清产品降低病毒污染的风险