预防是防止细胞培养过程中发生污染的办法。只有预防工作做在前,才能将发生污染的可能性降到zui小程度。
一般预防可从以下几方面着手:
1、添加抗生素
2、从物品、用品消毒灭菌着手
细胞培养所用物品清洗、消毒要*,各种溶液灭菌除菌要仔细,并在无菌试验阴性后才能使用。
操作室及剩余的无菌器材要定期清洁消毒灭菌。
3、从操作者做起
(1)进无菌室前要用肥皂洗手,按规定穿隔离衣。工作开始要先用75%酒精棉球擦手、擦瓶口和烧灼瓶口。
(2)操作者动作要轻,必须在火焰周围无菌区内打开瓶口,并将瓶口转动烧灼。操作时尽量不要谈话,若打喷嚏或咳嗽应转向背面。
(3)操作时要常更换吸管,一旦发现吸管口接触了手和其他污染物品应弃去。实验完毕用消毒水浸泡的纱布擦台面。
4、防止细胞交叉污染
在进行多种细胞培养操作时,所用器具要严格区分。
在进行换液或传代操作时,注射器和滴管不要触及细胞培养瓶瓶口,以免把细胞带到培养液中污染其他细胞。
细胞一旦购置或从别处引入,均应及早留种冻存,一旦发生污染可重新复苏培养。
5、无菌室的*消毒
1) 0.1%新洁尔灭全面*擦洗无菌室;
2)甲醛熏蒸法:甲醛是一种广谱灭菌剂菌,其水溶液和气休对各种细菌、芽孢及真菌等微生物均有杀灭作用。
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