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细胞培养基的种类很多，按其来源分为合成培养基和天然培养基（目前使用的培养基绝大部分是合成培养基），按其物质状态分为干粉培养基和液体培养基两类。干粉培养基需要实验者自己配制并灭菌，液体培养基由专业商家提供，用户可直接使用，非常方便。

1，合成培养基的主要成分有：氨基酸，碳水化合物，无机盐，维生素及其他辅助位置：

氨基酸

氨基酸是组成蛋白质的基本单位。不同种类的细胞对氨基酸的要求各异，但有几种氨基酸细胞自身不能合成，必须依靠培养液提供，这几种氨基酸称为必需氨基酸。其中谷氧酰胺是细胞合成核酸和蛋白质必须的氨基酸，在缺少谷氧酰胺时，细胞生长不良而死亡。因此，各种培养液中都有较大量的的谷氧酰胺。但是，由于谷氧酰胺在溶液中很不稳定，应置于-20℃冰箱中保存，在使用前加入培养液内。已含谷氧酰胺得培养液在4℃冰箱中储存两周以上时，还应重新加入原来量的谷氧酰胺。

碳水化合物

碳水化合物是细胞生长主要能量来源，其中有的是合成蛋白质和核酸的成分。主要有葡萄糖，核糖，脱氧核糖，丙酮酸钠和醋酸等.

无机盐

培养液中无机盐的主要功能是帮助细胞维持渗透压平衡。此外，通过提供钠，钾和钙离子，帮助细胞调节细胞膜功能。培养液的渗透压是一个非常重要的因素，细胞通常可耐受260m0sm/kg～320m0sm/kg。标准培养液的渗透压在此范围内波动。特别注意：向培养液中加入其他物质有可能会明显改变培养液的渗透压，特别是溶于强酸或强碱中的物质。向培养液中添加HEPES时需按以下方法调节钠离子浓度。

缓冲系统

大多数细胞所需pH在7.2-7.4.但是，细胞培养zui适pH值随培养的细胞种类不同而不同。成成纤维细胞喜欢较高pH（7.4-7.7）而传代转化细胞系则需要偏酸pH（7.0-7.4）。

由于多数培养液靠碳酸氢钠（NaHC03）与C02体系进行缓冲，因此气相中的C02浓度应与培养液中碳酸氢钠浓度相平衡。如果气相或培养箱空气中C02浓度设定在5%，培养液中NaHC03的加入量为1.97g/L;如果C02浓度维持在10%，培养液中NaHC03的加入量为3.95g/L。

细胞培养瓶盖不应该拧得太紧，以保证气体交换。HEPES是一种非离子缓冲液，在pH7.2-7.4范围内具有较好的缓冲能力，但是非常昂贵，在高浓度时对一些细胞可能有毒。HEPES缓冲液可与低水平的碳酸钠（0.34g/L）共用，以抵消因2额外加入HEPES引起的渗透压增加。在这种培养条件下，细胞培养瓶的盖子应拧紧，以防止培养液中所需的少量碳酸盐散入空气中。大多数培养液中含有酚红作为pH指示剂，酸性培养液呈橙黄色，碱性培养液呈深红色。

维生素

在细胞培养中，尽管血清是维生素重要来源，但是许多培养基中添加了各种维生素以适合更多的细胞系生长。

其他成分

有一些较为复杂的培养液中还包括其他一些成分。如在杂交瘤技术中常用的DMEM培养液，使用时还需要补加丙酮酸钠和2-疏基乙醇（2-Mercaptoethanol，2-Me）对细胞生长有很重要的作用。有人认为它相当于胎牛血清，有直接刺激细胞增殖作用。2-Me的活性部分是硫氧基，其中一个重要的作用是使血清中的含硫的化合物还原成谷胱甘肽，能诱导细胞增殖，为非特异性的激活作用。同时避免过氧化物对培养细胞的损害。另一个重要作用是促进分裂原的反应和DNA合成，增加植物凝集素（PHA）对淋巴细胞的转化作用，已广泛应用于杂交瘤技术，另外，也开始用于一些难以培养的细胞。2-Me是一种小分子还原剂，极易氧化。分子量为78.13，纯的2-Me是无色有刺激味的液体，比重为10110-1.120（Do20），常用终浓度为5×10-5M。常配制成0.1M的储存液，用时每升培养液加0.5ml。

液体培养基保存：

液体培养基应于4℃冰箱避光保存，实验前放入37℃预热。未加血清液体培养基有效期为12个月。液体培养基中的L-谷氧酰胺会随着储存时间的延长而慢慢分解。如果细胞生长不良，可以再添加适量L-谷氧酰胺。

干粉培养基保存：

4℃冰箱避光保存，有效期36个月

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